样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线(elutionprofile)。色谱图是指被分离组分的检测信号随时间分布的图象。色谱图形状随色谱方法和检测记录的方式不同而不同，迎头色谱和顶替色谱的色谱图为一系列台阶。

在洗脱法色谱中，若采用微分型检测器时，分离组分的检测信号随时间变化的图形为近似于高斯分布的一组色谱峰群，色谱图的纵坐标为检测器的响应信号，横坐标为时间、体积或距离。

相关术语

⊕色谱图（chromatogram）–样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号－时间曲线，又称色谱流出曲线（elutionprofile）。

⊕基线（baseline）–流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。

⊕噪音（noise）–基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。

⊕漂移（drift）–基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。

⊕色谱峰（peak）–组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。不对称色谱峰有两种：前延峰（leadingpeak）和脱尾峰（tailingpeak）.前者少见。

⊕拖尾因子（tailingfactor,T）–T=B/A,用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子（symmetryfactor）或不对称因子（asymmetryfactor）《中国药典》规定T应为0.95～1.05。T<0.95为前延峰，T>1.05为拖尾峰。

⊕峰底–基线上峰的起点至终点的距离。

⊕峰高（Peakheight,h）–峰的最高点至峰底的距离。

⊕峰宽（peakwidth,W）–峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ。

⊕半峰宽（peakwidthathalf-height,Wh/2）–峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ。

⊕标准偏差（standarddeviation,σ）–正态分布曲线x=±1时（拐点）的峰宽之半。正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小，分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。

⊕峰面积（peakarea,A）–峰与峰底所包围的面积。A=×σ×h=2.507σh=1.064Wh/2h

使用方法

横坐标是保留时间，纵坐标是UV的吸收峰，物质浓度和对应峰面积成正比。

色谱流出曲线

色谱图上的色谱流出曲线可以说明什么问题 ：/n根据色谱峰的数目，可判断样品中所含组分的最少个数；

根据色谱峰的保留值进行定性分析；

根据色谱峰的面积或峰高进行定量分析；

根据色谱峰的保留值和区域宽度评价色谱柱的分离效能；

根据两峰间的距离，可评价固定相及流动相选择是否合适。

常见问题

色谱图常见问题主要有两类：色谱峰峰形异常(例如负峰，宽峰，肩峰，双峰，峰形不对称等)以及色谱峰保留时间问题(保留时间不稳定等)

色谱峰峰形异常问题

(1)色谱图中未出峰：进样问题(未进样或样品分解)；流动相问题(泵未输液或流动相不正确)，检测器设置不正确或检测器有问题。

(2)一个或几个峰是负峰：流动相吸收本底高；进入空气；离子对分离中的系统峰；样品组分的吸收(RI或UV)低于流动相。

(3)所有的峰均为负峰：信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；光学装置尚未达到平衡。

(4)所有的峰都是宽峰：系统未达到平衡；溶样的溶剂比流动相强很多；色谱柱类型或尺寸不正确；色谱柱或保护柱被污染或降级；温度变化对色谱柱的影响。

(5)较早洗脱的峰呈宽峰：进样体积过大或样品浓度太高；进样器有问题，定量环(loop)大小不合适；在线过滤器、保护柱、色谱柱或管路堵塞；管路问题(内径不对或切管不正确)；管路连接问题(接头或锥箍不正确)；检测器时间常数不正确。

(6)峰比预想的要小：样品黏度过大；进样器有问题或进样体积有误；检测器设置不正确，定量环体积不正确；检测器输出未置零；用了不正确的检测器输出信号；检测池被污染；检测器的灯可能有问题。

(7)双峰或肩峰：进样量或样品浓度过大；保护柱或色谱柱进口堵塞；保护柱或色谱柱污染或失效。

(8)前伸峰：进样量或样品浓度过大；溶样的溶剂相对于流动相太强；保护柱或色谱柱污染或失效。

(9)拖尾峰：保护柱污染或色谱柱失效；进样问题；检测器时间常数不正确。

(10)平头峰：检测器设置不正确；进样体积太大或样品浓度太高。

(11)流动相洗涤强度南弱渐强时出现很多杂质峰：强溶剂将弱溶剂洗不出的杂质冲出来了，不影响柱的性能。

(12)在UV色谱图中，靠近死时间处出现负峰：进样时压力波动所致；样品溶剂比流动相的UV吸收值低。

色谱峰保留时间问题

(1)保留时间飘忽不定(各次运行之间)：系统不稳定或未达到平衡；泵压力不稳，有气泡；进样体积过大或浓度过大；温度波动；流动相混合不均匀；色谱柱被污染。

(2)保留时间增加或减少(各次运行之间)：系统未达到平衡；泵流速变化；温度变化；柱污染，柱效下降；流动相被污染；溶剂入口过滤器堵或管路堵塞；系统渗漏。

(3)保留时间改变到一个新的恒定值：流动相不正确或其组成不正确；泵流速变化；实际输液的流速不正确(泵失灵或故障)；温度变化；色谱柱尺寸或类型不正确；柱被污染；流动相含有稳定剂或稳定剂发生变化；输液系统的梯度滞后体积不正确 。